[生化] 等電點聚焦
Isoelectric focusing may be used as another indication.
等電聚焦可以用為另一指标。
Haemoglobin polymorphism of Chinese miniature horses was examined by agarose gel isoelectric focusing.
采用等電聚焦電泳對中國矮馬進行了血紅蛋白多态性的檢測。
The results showed that low ion intensity sample washing buffer improved the performance of isoelectric focusing.
結果表明：采用低離子強度的緩沖液沖洗收集樣品可以提高等電聚焦效果。
After quantification, the protein samples were separated by isoelectric focusing electrophoresis and then by SDS-PAGE.
定量後，分别進行一維等電聚焦分離和二維聚************凝膠電泳分離。
Isoelectric focusing of STFC in thin-layer polyacrylamide gel obtained only one band as shown by Coomassie Blue staining.
在等電點聚焦分析中該成分為一條考馬斯亮藍染色帶。
等電聚焦（Isoelectric Focusing, IEF）是一種高分辨率的電泳技術，用于根據蛋白質或其他兩性分子的等電點（pI）進行分離。其核心原理是：在具有穩定pH梯度的介質（如聚丙烯酰胺凝膠）中施加電場，帶電分子将遷移至其淨電荷為零的pH位置（即等電點），并在該點聚焦形成窄帶，從而實現精确分離。
通過兩性電解質載體（如Ampholine或Pharmalyte）在電場作用下形成從陽極（低pH）到陰極（高pH）的線性pH梯度。兩性電解質本身具有不同pI值，在電場中遷移至各自等電點并穩定維持梯度 。
帶電分子在pH梯度中遷移：若所處環境pH < pI，分子帶正電，向陽極移動；若pH > pI，分子帶負電，向陰極移動。最終在pH = pI處停止遷移，實現聚焦 。
擴散效應被電場力抵消，即使電荷差異極小的分子（如pI相差0.01單位）也能分離，分辨率顯著高于常規電泳 。
作為雙向電泳（2D-PAGE）的第一維步驟，分離複雜蛋白質混合物，為質譜分析提供基礎 。
檢測血紅蛋白變異體（如鐮狀細胞貧血）、同工酶譜分析等，輔助疾病診斷 。
分析單克隆抗體的電荷異質性（如脫酰胺化修飾），确保藥物批間一緻性 。
常用聚丙烯酰胺凝膠或固定化pH梯度膠（IPG膠條），後者梯度更穩定，重複性更佳 。
需恒定高電壓（通常1500-3500 V），低溫運行以防止焦耳熱導緻蛋白變性 。
聚焦後通過考馬斯亮藍、銀染或熒光染色可視化蛋白條帶，或轉印至膜進行免疫檢測 。
Righetti, P.G. (2005). Isoelectric Focusing: Theory, Methodology and Applications. Elsevier.
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Isoelectric Focusing（等電聚焦） 是一種基于蛋白質等電點差異進行分離的電泳技術，主要用于生物化學和分子生物學領域。以下是詳細解釋：
如需進一步了解操作步驟或具體案例，可參考生物化學實驗手冊或專業文獻來源。
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