
【化】 spectrophotometry
cent; dispart; distribute; divide; marking; minute
【計】 M
【醫】 deci-; Div.; divi-divi
light; ray; honour; merely; naked; scenery; smooth
【化】 light
【醫】 light; phot-; photo-
photometry
分光光度測定(Spectrophotometry)是一種基于物質對特定波長光的吸收特性進行定量或定性分析的儀器分析方法。該方法通過測量樣品溶液對單色光的吸光度(Absorbance),依據朗伯-比爾定律(Lambert-Beer's Law)計算待測物質的濃度或含量。
物質分子吸收特定波長的光時發生能級躍遷,吸光度(A)與溶液濃度(c)及光程長度(l)成正比,公式為:
$$
A = varepsilon cdot c cdot l
$$
其中(varepsilon) 為摩爾吸光系數,是物質的特征常數。該定律成立需滿足單色光、稀溶液及無化學反應等條件。
優勢:靈敏度高(檢出限達(10^{-6} text{mol/L}))、操作快捷、設備普及。
局限:需透明溶液、幹擾物可能影響準确性、僅適用于吸光物質。
參考來源:
分光光度測定是一種基于物質對光的選擇性吸收特性進行分析的方法,主要用于物質的定性和定量檢測。以下從原理、特點和應用三方面進行綜合說明:
光吸收定律
其理論基礎是朗伯-比爾定律,即吸光度(A)與溶液濃度(c)和光程長度(l)成正比,公式為:
$$
A = varepsilon cdot c cdot l
$$
其中ε為摩爾吸光系數,反映物質對特定波長光的吸收能力。
選擇性吸收特性
不同物質因分子結構差異,會吸收特定波長的光,形成特征吸收光譜。例如紫外區(200-400nm)、可見光區(400-760nm)、紅外區(2.5-25μm)對應不同分析需求。
高靈敏度與精度
可檢測微量物質(低至10^-6~10^-7 g/mL),單色光純度更高(半寬5-10nm),相比傳統比色法誤差更小。
廣泛適用性
不僅適用于有色溶液,還能通過紫外/紅外區分析無色物質(如核酸、蛋白質)。
多組分同時分析
利用吸光度加和性,可在特定條件下實現混合溶液中多種成分的同步測定。
生物化學
檢測蛋白質濃度(如BCA法)、酶活性、核酸純度等。
環境監測
分析水體中的重金屬離子(如鉛、汞)及有機污染物含量。
工業與材料科學
測定染料濃度、金屬離子配位結構,或通過紅外分光光度法研究材料分子振動特性。
儀器類型:常用紫外-可見分光光度計、原子吸收分光光度計等,通過棱鏡或光栅分光系統獲得高純度單色光。
【别人正在浏覽】