洛曼氏試劑英文解釋翻譯、洛曼氏試劑的近義詞、反義詞、例句
英語翻譯:
【醫】 Lohmann's reagent
分詞翻譯:
曼的英語翻譯:
graceful; prolonged
氏的英語翻譯:
family name; surname
試劑的英語翻譯:
reagent
【化】 reagent
【醫】 agentia; reagent
專業解析
洛曼氏試劑(Lowry Reagent),在生物化學領域特指用于蛋白質定量分析的複合試劑,由美國生物化學家奧利弗·洛瑞(Oliver H. Lowry)及其同事于1951年發明并命名。它并非單一化合物,而是一套反應體系的核心組成部分。
其核心含義和原理如下:
-
定義與組成:
- 洛曼氏試劑通常指用于Lowry法(福林酚法) 蛋白質定量測定中的關鍵試劑組合。
- 主要包含兩部分:
- 試劑A(堿性銅試劑):通常由碳酸鈉、氫氧化鈉、硫酸銅和酒石酸鈉(或鉀)組成。它在堿性環境下将蛋白質中的肽鍵(雙縮脲反應)以及酪氨酸、色氨酸等殘基與銅離子絡合,形成銅-蛋白質複合物。
- 試劑B(福林酚試劑/Folin-Ciocalteu試劑):一種含有磷钼酸和磷鎢酸的複合物(雜多酸)。它被銅-蛋白質複合物還原,産生深藍色的钼藍和鎢藍混合物。
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反應原理:
- 蛋白質首先在堿性條件下與銅離子反應生成絡合物。
- 此絡合物具有很強的還原能力,能将福林酚試劑中的雜多酸(磷钼鎢酸)還原。
- 還原産物呈現強烈的藍色(最大吸收峰通常在750nm波長附近)。
- 藍色的深淺與樣品中蛋白質的濃度成正比,通過比色法即可定量測定蛋白質含量。
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應用與意義:
- 廣泛性:Lowry法曾是實驗室最常用的蛋白質定量方法之一,因其靈敏度顯著高于之前的雙縮脲法。
- 靈敏度:可檢測微克級别的蛋白質(通常範圍在5-100 μg)。
- 適用性:適用于大多數蛋白質溶液,尤其對含有酪氨酸和色氨酸的蛋白質靈敏度更高。
- 局限性:反應受多種物質幹擾,如去垢劑(Triton X-100, SDS)、硫醇類化合物(DTT, β-巯基乙醇)、糖類、某些緩沖液組分(Tris, EDTA)等。操作步驟相對繁瑣,需要精确控制反應時間和溫度。
權威性參考來源(基于化學文獻與标準方法):
- 原始文獻:Lowry, O. H., Rosebrough, N. J., Farr, A. L., & Randall, R. J. (1951). Protein measurement with the Folin phenol reagent. Journal of Biological Chemistry, 193(1), 265–275. 該文首次詳細描述了該方法及試劑的使用。可在學術數據庫(如PubMed, Sciencedirect)檢索獲取。
- 标準生化方法教材:如《酶學方法》(Methods in Enzymology)、《分子克隆實驗指南》(Molecular Cloning: A Laboratory Manual) 等經典實驗手冊均收錄并詳細描述了Lowry法及其試劑配制。
- 專業機構數據庫:美國國家生物技術信息中心(NCBI)的PubMed數據庫收錄了大量引用原始文獻及後續應用、改進Lowry法的研究論文。
網絡擴展解釋
洛曼氏試劑(Lomant 試劑)是DSP(Dithiobis[succinimidyl propionate])的别稱,屬于一種同型雙功能交聯劑,主要用于生物化學領域的分子偶聯研究。以下是其核心特性與功能的詳細解釋:
1.化學結構與反應性
- 雙功能基團:兩端均含有N-羟基琥珀酰亞胺酯(NHS酯),能特異性與含伯胺基團(如蛋白質中的賴氨酸殘基或N端氨基)反應,形成穩定的酰胺鍵。
- 間隔臂特性:通過8個碳原子的疏水間隔臂連接兩端基團,使其具有膜穿透性,適用于細胞内或膜内靶标交聯。
2.關鍵特性
- 可切割性:間隔臂中的二硫鍵可被還原劑(如DTT、TCEP)或SDS-PAGE上樣緩沖液切斷,便于後續分離和分析交聯産物。
- 溶解性:不溶于水,需溶于有機溶劑(如DMF、DMSO),與類似試劑DTSSP(水溶性)形成互補。
3.主要應用場景
- 固定蛋白相互作用:用于捕獲弱結合或瞬時結合的蛋白複合物(如信號傳導通路中的分子)。
- 細胞内交聯:在細胞裂解或免疫沉澱前穩定細胞内蛋白結構。
- 組織處理:固定組織樣本以保護RNA完整性,適用于免疫染色等研究。
- 生物偶聯物制備:通過一步反應實現蛋白質與其他分子的偶聯。
4.注意事項
- 反應條件:需在pH 7-9範圍内進行,以确保NHS酯與伯胺的高效結合。
- 還原環境幹擾:若後續實驗需保持二硫鍵完整,需避免使用含還原劑的緩沖液。
如需更詳細的技術參數或實驗方案,可進一步查閱生物化學試劑手冊或相關文獻。
分類
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