洛曼氏试剂英文解释翻译、洛曼氏试剂的近义词、反义词、例句
英语翻译:
【医】 Lohmann's reagent
分词翻译:
曼的英语翻译:
graceful; prolonged
氏的英语翻译:
family name; surname
试剂的英语翻译:
reagent
【化】 reagent
【医】 agentia; reagent
专业解析
洛曼氏试剂(Lowry Reagent),在生物化学领域特指用于蛋白质定量分析的复合试剂,由美国生物化学家奥利弗·洛瑞(Oliver H. Lowry)及其同事于1951年发明并命名。它并非单一化合物,而是一套反应体系的核心组成部分。
其核心含义和原理如下:
-
定义与组成:
- 洛曼氏试剂通常指用于Lowry法(福林酚法) 蛋白质定量测定中的关键试剂组合。
- 主要包含两部分:
- 试剂A(碱性铜试剂):通常由碳酸钠、氢氧化钠、硫酸铜和酒石酸钠(或钾)组成。它在碱性环境下将蛋白质中的肽键(双缩脲反应)以及酪氨酸、色氨酸等残基与铜离子络合,形成铜-蛋白质复合物。
- 试剂B(福林酚试剂/Folin-Ciocalteu试剂):一种含有磷钼酸和磷钨酸的复合物(杂多酸)。它被铜-蛋白质复合物还原,产生深蓝色的钼蓝和钨蓝混合物。
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反应原理:
- 蛋白质首先在碱性条件下与铜离子反应生成络合物。
- 此络合物具有很强的还原能力,能将福林酚试剂中的杂多酸(磷钼钨酸)还原。
- 还原产物呈现强烈的蓝色(最大吸收峰通常在750nm波长附近)。
- 蓝色的深浅与样品中蛋白质的浓度成正比,通过比色法即可定量测定蛋白质含量。
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应用与意义:
- 广泛性:Lowry法曾是实验室最常用的蛋白质定量方法之一,因其灵敏度显著高于之前的双缩脲法。
- 灵敏度:可检测微克级别的蛋白质(通常范围在5-100 μg)。
- 适用性:适用于大多数蛋白质溶液,尤其对含有酪氨酸和色氨酸的蛋白质灵敏度更高。
- 局限性:反应受多种物质干扰,如去垢剂(Triton X-100, SDS)、硫醇类化合物(DTT, β-巯基乙醇)、糖类、某些缓冲液组分(Tris, EDTA)等。操作步骤相对繁琐,需要精确控制反应时间和温度。
权威性参考来源(基于化学文献与标准方法):
- 原始文献:Lowry, O. H., Rosebrough, N. J., Farr, A. L., & Randall, R. J. (1951). Protein measurement with the Folin phenol reagent. Journal of Biological Chemistry, 193(1), 265–275. 该文首次详细描述了该方法及试剂的使用。可在学术数据库(如PubMed, Sciencedirect)检索获取。
- 标准生化方法教材:如《酶学方法》(Methods in Enzymology)、《分子克隆实验指南》(Molecular Cloning: A Laboratory Manual) 等经典实验手册均收录并详细描述了Lowry法及其试剂配制。
- 专业机构数据库:美国国家生物技术信息中心(NCBI)的PubMed数据库收录了大量引用原始文献及后续应用、改进Lowry法的研究论文。
网络扩展解释
洛曼氏试剂(Lomant 试剂)是DSP(Dithiobis[succinimidyl propionate])的别称,属于一种同型双功能交联剂,主要用于生物化学领域的分子偶联研究。以下是其核心特性与功能的详细解释:
1.化学结构与反应性
- 双功能基团:两端均含有N-羟基琥珀酰亚胺酯(NHS酯),能特异性与含伯胺基团(如蛋白质中的赖氨酸残基或N端氨基)反应,形成稳定的酰胺键。
- 间隔臂特性:通过8个碳原子的疏水间隔臂连接两端基团,使其具有膜穿透性,适用于细胞内或膜内靶标交联。
2.关键特性
- 可切割性:间隔臂中的二硫键可被还原剂(如DTT、TCEP)或SDS-PAGE上样缓冲液切断,便于后续分离和分析交联产物。
- 溶解性:不溶于水,需溶于有机溶剂(如DMF、DMSO),与类似试剂DTSSP(水溶性)形成互补。
3.主要应用场景
- 固定蛋白相互作用:用于捕获弱结合或瞬时结合的蛋白复合物(如信号传导通路中的分子)。
- 细胞内交联:在细胞裂解或免疫沉淀前稳定细胞内蛋白结构。
- 组织处理:固定组织样本以保护RNA完整性,适用于免疫染色等研究。
- 生物偶联物制备:通过一步反应实现蛋白质与其他分子的偶联。
4.注意事项
- 反应条件:需在pH 7-9范围内进行,以确保NHS酯与伯胺的高效结合。
- 还原环境干扰:若后续实验需保持二硫键完整,需避免使用含还原剂的缓冲液。
如需更详细的技术参数或实验方案,可进一步查阅生物化学试剂手册或相关文献。
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