
熒光胺
The method involved solid-phase extraction of insulin from plasma and pre-column derivatization of insulin with fluorescamine.
該方法涉及從血漿中固相提取胰島素,以及用熒光胺對胰島素進行柱前衍生。
Fluorescamine(熒光胺)是一種專為檢測伯胺類化合物設計的靈敏熒光标記試劑。其核心功能是與伯胺(-NH₂)在溫和條件下快速發生反應,生成具有強熒光的吡咯啉酮衍生物,而該反應副産物(非熒光部分)可溶于水,便于分離檢測。
高靈敏度與選擇性
對伯胺基團(如氨基酸、多肽、蛋白質的N端)具有高度特異性,檢出限可達皮摩爾級别。反應在室溫、中性或弱堿性緩沖液中數秒内完成,尤其適合液相色譜(HPLC)的柱後衍生化分析。
熒光性質
反應産物的最大激發波長約390 nm,發射波長約475 nm(藍綠色熒光)。其熒光強度與伯胺濃度呈線性關系,且不受常見生物樣本中其他基團(如巯基、羟基)幹擾。
生物醫學應用
熒光胺(化學式:C₁₇H₁₄O₄)屬于螺環化合物,其反應機制如下:
反應通式:
$$ce{Fluorescamine + R-NH2 -> Fluorescent Pyrrolinone + H2O + Nontext{-}fluorescent Byproduct}$$
來源說明:内容綜合專業化學數據庫與生物分析文獻,包括:
Fluorescamine(熒光胺)是一種常用于生物化學檢測的合成熒光試劑,其核心功能是與伯胺基團(-NH₂)特異性反應,生成具有強熒光的産物。以下是詳細解釋:
若需檢測其他類型胺基,可選用鄰苯二醛(OPA)或丹磺酰氯(Dansyl chloride)等試劑。
如果需要具體實驗步驟或化學結構式,可進一步說明!
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