
荧光胺
The method involved solid-phase extraction of insulin from plasma and pre-column derivatization of insulin with fluorescamine.
该方法涉及从血浆中固相提取胰岛素,以及用荧光胺对胰岛素进行柱前衍生。
Fluorescamine(荧光胺)是一种专为检测伯胺类化合物设计的灵敏荧光标记试剂。其核心功能是与伯胺(-NH₂)在温和条件下快速发生反应,生成具有强荧光的吡咯啉酮衍生物,而该反应副产物(非荧光部分)可溶于水,便于分离检测。
高灵敏度与选择性
对伯胺基团(如氨基酸、多肽、蛋白质的N端)具有高度特异性,检出限可达皮摩尔级别。反应在室温、中性或弱碱性缓冲液中数秒内完成,尤其适合液相色谱(HPLC)的柱后衍生化分析。
荧光性质
反应产物的最大激发波长约390 nm,发射波长约475 nm(蓝绿色荧光)。其荧光强度与伯胺浓度呈线性关系,且不受常见生物样本中其他基团(如巯基、羟基)干扰。
生物医学应用
荧光胺(化学式:C₁₇H₁₄O₄)属于螺环化合物,其反应机制如下:
反应通式:
$$ce{Fluorescamine + R-NH2 -> Fluorescent Pyrrolinone + H2O + Nontext{-}fluorescent Byproduct}$$
来源说明:内容综合专业化学数据库与生物分析文献,包括:
Fluorescamine(荧光胺)是一种常用于生物化学检测的合成荧光试剂,其核心功能是与伯胺基团(-NH₂)特异性反应,生成具有强荧光的产物。以下是详细解释:
若需检测其他类型胺基,可选用邻苯二醛(OPA)或丹磺酰氯(Dansyl chloride)等试剂。
如果需要具体实验步骤或化学结构式,可进一步说明!
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