western blotting是什么意思，western blotting的意思翻译、用法、同义词、例句

常用词典

免疫印迹；蛋白免疫印迹；西方墨点法

例句

The presence of protein was measured by western blotting.

蛋白的测定采用蛋白质印迹法。

Western blotting was used to detect protein expression of VEGF.

用免疫蛋白印迹法检测细胞VEGF蛋白表达。

Immunocytochemistry and western blotting technology were used to identify the cell phenotype.

印迹免疫检测技术和免疫细胞化学技术鉴定细胞表型。

The changes of BMP2 and osteopontin were detected by immunohistochemistry and Western blotting.

骨形态发生蛋白2与骨桥蛋白检测：采用免疫组织化学染色与蛋白印迹方法。

The changes of BMP2 and osteopontin were detected by immunohistochemistry and Western blotting.

③骨形态发生蛋白2与骨桥蛋白检测：采用免疫组织化学染色与蛋白印迹方法。

同义词

|immunoblot/Western blot test;免疫印迹；蛋白免疫印迹；西方墨点法

专业解析

Western Blotting（蛋白质免疫印迹）是一种广泛应用于分子生物学、生物化学和医学研究中的实验技术，主要用于检测复杂生物样品（如细胞或组织裂解液）中特定蛋白质的表达水平、分子量大小及翻译后修饰状态。其名称源于发明者George Stark团队对Edwin Southern（DNA印迹法发明者）的致敬，与Southern Blotting（DNA检测）对应，后衍生出Northern Blotting（RNA检测）。

实验原理与步骤：

蛋白质电泳分离（SDS-PAGE）
样品经变性处理（加入SDS和还原剂）后，在聚丙烯酰胺凝胶电场中按分子量大小分离。

转膜（Blotting）
将凝胶中分离的蛋白质转移（印迹）到固相支持膜（常用硝酸纤维素膜或PVDF膜）上，便于后续检测。

封闭（Blocking）
用非特异性蛋白（如牛血清白蛋白BSA或脱脂牛奶）封闭膜上未结合位点，减少抗体非特异性结合。

一抗孵育（Primary Antibody Incubation）
加入针对目标蛋白的特异性一抗，与膜上靶蛋白结合。

二抗孵育（Secondary Antibody Incubation）
加入标记酶（如辣根过氧化物酶HRP）或荧光基团的二抗，二抗可特异性识别一抗。

信号检测（Detection）
通过化学发光（酶催化底物发光）、荧光成像或显色法，可视化目标蛋白条带位置及强度。

核心应用场景：

目标蛋白定性/定量分析：验证基因过表达或敲除效果，如检测疾病标志物表达。
分子量确认：通过与标准品对比，判断蛋白是否发生剪切或修饰。
翻译后修饰研究：结合磷酸化、泛素化等修饰特异性抗体，分析蛋白修饰状态。
诊断工具：临床用于检测病原体抗体（如HIV、莱姆病）或自身免疫性疾病标志物。

技术优势与局限：

优势在于特异性高（依赖抗体质量）、可半定量分析；局限包括操作耗时、需优化条件（如抗体浓度）且对低丰度蛋白灵敏度有限（需高表达样品或预富集）。

权威参考文献来源：

《Nature Protocols》技术指南
Western blotting: Sample preparation to detection（详细标准化流程）

《Cold Spring Harbor Protocols》方法学
Western Blotting Technique（经典操作规范）

美国国立卫生研究院（NIH）技术手册
Principles of Western Blotting（原理与故障排除）

《Journal of Visualized Experiments》视频实验方案
Step-by-Step Western Blot Analysis（可视化操作演示）

网络扩展资料

Western blotting（蛋白质印迹法）是一种广泛应用于分子生物学和生物化学领域的实验技术，主要用于检测和分析特定蛋白质的表达及特性。以下为详细解释：

1.定义与原理

Western blotting通过抗原-抗体特异性结合的原理检测目标蛋白。其核心步骤包括：

电泳分离：利用聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）按分子量分离蛋白质混合物。
转膜：将分离后的蛋白质转移到固相载体（如硝酸纤维素膜或PVDF膜）上。
抗体检测：依次使用一抗（特异性结合目标蛋白）和标记的二抗（如酶标抗体），通过化学发光或显色反应实现可视化检测。

2.主要应用

蛋白质表达分析：检测特定蛋白质在细胞或组织中的表达水平。
翻译后修饰研究：如磷酸化、糖基化等修饰的检测。
抗体验证：确认抗体的特异性及效价。
疾病研究：用于癌症、神经退行性疾病等病理机制中标志蛋白的鉴定。

3.操作流程

典型步骤包括：

样品制备：提取蛋白质并定量；
电泳分离：按分子量分离蛋白质；
转膜：将蛋白质转移至膜载体；
封闭：使用脱脂奶粉或BSA封闭非特异性结合位点；
抗体孵育：一抗结合目标蛋白，二抗结合一抗；
显色/成像：通过化学发光或染色法分析结果。

4.与其他技术的区别

Southern blotting：检测DNA，使用DNA探针。
Northern blotting：检测RNA，使用RNA探针。
Western blotting：唯一针对蛋白质的技术，依赖抗体探针。

5.历史背景

该技术于1979年由George提出，现已成为蛋白质研究的标准方法之一。

提示：如需更详细的实验指南，可参考权威资料如Takara的《Western Blotting实验操作指南》。

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