
【化】 gel chromatography
gel
【化】 gel; jel
【醫】 gel; gelatum; jelly
【化】 chromatography
【醫】 chromatography
凝膠色譜法(Gel Chromatography),又稱尺寸排阻色譜法(Size Exclusion Chromatography, SEC),是一種基于分子尺寸差異進行分離的分析技術。其原理是通過多孔性填料(如交聯葡聚糖或矽膠)的孔徑大小,使小分子物質進入孔道内部而滞留時間較長,大分子因無法進入孔道而優先被流動相洗脫。該方法廣泛應用于生物大分子(如蛋白質、核酸)的純化及聚合物分子量分布的測定。
根據國際純粹與應用化學聯合會(IUPAC)定義,凝膠色譜法的分離過程遵循以下公式:
$$
V_e = V_0 + K_d cdot V_i
$$
其中,( V_e )為洗脫體積,( V_0 )為填料間隙體積,( K_d )為分配系數,( V_i )為填料孔内體積。這一數學模型表明,分子量越大,( K_d )值越小,洗脫速度越快。
技術特點包括:
權威文獻顯示,該技術自1959年由Porath和Flodin提出後,已成為生物制藥領域質量控制的核心手段,尤其在單克隆抗體純化中占據關鍵地位。
凝膠色譜法是一種基于分子尺寸差異進行分離分析的色譜技術,以下從定義、原理、分類和應用等方面綜合解釋:
凝膠色譜法(Gel Chromatography)又稱分子排阻色譜法或體積排阻色譜法。它起源于20世紀60年代初,通過多孔凝膠填料實現對樣品中不同大小分子的分離,尤其擅長高分子物質(如蛋白質、多糖、合成聚合物等)的分離和相對分子質量分布分析。
體積排阻效應
固定相為多孔材料(如交聯聚苯乙烯、多孔矽膠),分子根據尺寸選擇性進入填料孔隙:
保留公式
保留體積($V_R$)與分子量($M$)的關系可表示為:
$$
V_R = K_1 - K_2 log M
$$
其中$K_1$、$K_2$為常數,通過标準曲線可推算未知樣品的分子量分布。
根據流動相性質分為兩類:
如需更深入的技術參數或實驗流程,和中的檢測服務及操作說明。
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