
【機】 biuret reaction
【機】 allophanamide; biuret; carbamylurea
make water; stale; urine
【醫】 ur-; urina; urine; urino-; uro-; urono-
feedback; reaction; response
【醫】 reaction; response
縮二脲反應(Biuret Reaction)是生物化學領域用于檢測蛋白質及多肽鍊中肽鍵的經典顯色反應。該名稱源自其反應中間産物"縮二脲"(Biuret,化學式NH₂CONHCONH₂),該化合物由兩分子尿素在150-160℃加熱縮合形成。
在堿性環境中,銅離子(Cu²⁺)與肽鍵中的氮原子和氧原子發生配位作用,形成紫紅色絡合物。其顯色強度與肽鍵數量成正比,檢測範圍通常為0.5-10mg/mL,最大吸收峰位于540-560nm波長區間。反應式可表示為:
$$ R-NH-CO-NH-R' + Cu^{2+} + OH^- rightarrow [Cu(R-NH-CO-NH-R')]^+ (紫紅色) $$
該反應在臨床檢驗中廣泛應用于血清總蛋白定量檢測,其特異性表現為:含兩個以上肽鍊的化合物顯粉紅色,含四個以上肽鍊顯紫色。需注意高濃度铵鹽可能幹擾檢測結果。現代生化分析儀多采用改良比色法,配合标準曲線實現精準定量分析。
縮二脲反應(又稱雙縮脲反應)是一種用于檢測含有兩個或以上肽鍵的化合物(如蛋白質、多肽等)的化學顯色反應。以下是詳細解釋:
反應原理
在堿性環境(如NaOH溶液)中,含有多個肽鍵的化合物能與硫酸銅(CuSO₄)結合,形成紫色或紫紅色絡合物。這一顯色現象源于銅離子與多個肽鍵中的氮原子形成配位鍵,生成穩定的絡合物結構。
實驗現象
反應後溶液呈現紫色或紫紅色,顔色深淺與肽鍵數量相關(通常至少需要兩個肽鍵)。例如,蛋白質或長鍊多肽因含多個肽鍵可顯色,而單個氨基酸則無此反應。
應用範圍
該反應常用于生物化學中快速鑒定蛋白質或肽類物質。需要注意的是,縮二脲(一種尿素縮合産物)本身雖含類似結構,但實驗中更多以蛋白質為檢測對象。
與其他反應的區分
不同于茚三酮反應(檢測氨基酸或單肽),縮二脲反應特異性針對多肽鍊結構,且需在堿性條件下完成。
公式表達(以肽鍵與銅離子結合為例):
$$
text{多肽} + text{Cu}^{2+} xrightarrow{text{堿性條件}} text{紫色絡合物}
$$
縮二脲反應是生物化學中的重要顯色實驗,通過顔色變化快速判斷樣品中是否含有蛋白質或多肽類物質。
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