聚焦电泳法英文解释翻译、聚焦电泳法的近义词、反义词、例句
英语翻译:
【化】 electrofocusing electrophoresis
分词翻译:
聚焦的英语翻译:
focalize; focus; focusing
【计】 focussing
【化】 focusing
电泳法的英语翻译:
【医】 electrophoresis method
专业解析
聚焦电泳法(Isoelectric Focusing,简称IEF)是一种基于蛋白质或其他两性分子等电点差异的高分辨率分离技术。其核心原理是:在具有pH梯度的电场中,带电分子会迁移至与其等电点(pI)相对应的pH区域,并在该位置因净电荷为零而停止移动,从而实现聚焦分离。该技术广泛应用于蛋白质组学研究、临床诊断(如血红蛋白变异体检测)及生物制药质量控制等领域。
技术要点
- pH梯度形成:通过两性电解质载体或固定化pH梯度胶条建立稳定的pH线性梯度,这是实现聚焦的基础条件。
- 电场驱动迁移:施加直流电场后,带正电的分子向阴极移动,带负电的向阳极移动,直至达到pI位置。
- 高分辨率优势:可区分等电点差异仅0.01 pH单位的蛋白质,显著优于传统电泳。
权威参考文献
此方法在生物医学领域的应用已被《分析化学》(Analytical Chemistry)等期刊多次验证,证实其在复杂样本分析中的可靠性。
网络扩展解释
聚焦电泳法(等电聚焦电泳法)的详细解释
1.定义
聚焦电泳法,全称为等电聚焦电泳法(Isoelectric Focusing, IEF),是一种利用蛋白质等电点(pI)差异进行分离的电泳技术。其核心原理是通过两性电解质在电场中形成稳定的pH梯度,使不同等电点的蛋白质迁移至与其pI对应的pH位置并聚焦成窄带,最终实现分离。
2.原理
- pH梯度形成:在凝胶或溶液中加入两性电解质,通电后形成从阳极到阴极逐渐升高的pH梯度。
- 蛋白质迁移:蛋白质在pH低于其pI时带正电,向负极移动;在pH高于其pI时带负电,向正极移动。当迁移至pH等于其pI的位置时,蛋白质净电荷为零,停止移动并聚焦成带。
- 高分辨率:因蛋白质仅在pI处停留,即使长时间电泳也不会扩散,反而提高分离效果。
3.操作步骤
- 制备凝胶:在支持介质(如聚丙烯酰胺凝胶)中加入两性电解质。
- 建立电场:通电后形成pH梯度。
- 加样与电泳:将蛋白质样品加入凝胶,通电后蛋白质根据pI迁移并聚焦。
- 检测:通过染色或成像观察分离后的蛋白质条带。
4.优点与缺点
- 优点:
- 分辨率极高,可区分等电点相差0.01 pH单位的蛋白质。
- 重复性好,样品容量大,适用于复杂混合物的分析(如血清蛋白)。
- 操作简便,广泛应用于生物化学、医学研究等领域。
- 缺点:
- 需封闭系统防止氧化,早期技术多为垂直管式,操作受限。
- 对极端pH(如强酸性/碱性)蛋白质分离效果较差。
5.应用领域
- 蛋白质分析:检测蛋白质纯度、测定等电点。
- 双向电泳:与SDS-PAGE联用,实现蛋白质按pI和分子量的二维分离。
- 临床诊断:用于疾病标志物的检测(如异常蛋白分析)。
总结
等电聚焦电泳法通过精准的pH梯度设计,实现了高分辨率的蛋白质分离。其技术核心在于利用等电点差异,结合两性电解质的特性,是生物医学研究中的重要工具。更多技术细节可参考相关文献或实验手册。
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