phagemid是什么意思，phagemid的意思翻译、用法、同义词、例句

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专业解析

Phagemid（噬菌粒）是一种人工构建的杂交载体，它结合了质粒（plasmid）和噬菌体（bacteriophage，如M13或f1噬菌体）的关键遗传元件。这种设计使其能够在细菌细胞内像普通质粒一样复制，并在特定条件下（如辅助噬菌体感染时）像单链噬菌体一样被包装和分泌。

核心特征与工作原理

1. 双功能复制起点

   Phagemid包含两类复制起点（Origin of Replication, ori）：

   • 质粒复制起点（如ColE1）：允许载体在宿主细菌内以双链DNA形式自主复制，无需辅助噬菌体参与。
   • 噬菌体复制起点（如f1 ori）：在辅助噬菌体（如M13KO7）感染宿主时，噬菌体蛋白会识别该起点，启动单链DNA的复制与包装。

2. 包装信号（Packaging Signal, PS）

   含噬菌体DNA包装所需的特定序列（如M13的IG区），确保单链DNA能被组装进噬菌体颗粒并分泌到胞外。

3. 选择性标记

   通常携带抗生素抗性基因（如Ampᵣ），便于筛选含phagemid的细菌克隆。

主要应用场景

• 单链DNA制备：通过辅助噬菌体超感染，可大量产生含目标序列的单链DNA，适用于：
  • DNA测序（Sanger法）
  • 定点突变（Site-directed mutagenesis）
  • 噬菌体展示技术（Phage display）
• 基因克隆与表达：作为常规质粒进行基因克隆、蛋白表达或文库构建。

优势与局限性

• 优势：兼具质粒的稳定性和噬菌体的单链DNA生产能力；载体较小（通常3-5 kb），克隆容量较大。
• 局限性：依赖辅助噬菌体实现单链DNA包装；包装效率可能受插入片段大小或序列影响。

参考文献来源：

1. 《分子克隆实验指南》（Molecular Cloning: A Laboratory Manual），第四版，Cold Spring Harbor Laboratory Press，第3章 "噬菌体、质粒与杂交载体"（Chapter 3: Bacteriophages, Plasmids, and Hybrid Vectors）。
2. 美国国家生物技术信息中心（NCBI）《分子生物学数据库》术语库（NCBI Molecular Biology Glossary）。
3. 《现代基因操作技术》（Modern Techniques in Genetic Manipulation），Springer出版社，第7章 "载体系统设计"（Chapter 7: Vector System Design）。

网络扩展资料

噬菌粒（phagemid）是一种结合了质粒和噬菌体特性的基因工程载体，主要用于分子克隆和基因表达研究。以下是详细解释：

1. 定义与结构
   phagemid由质粒的复制起点（如ColE1）和噬菌体的包装信号序列（如M13噬菌体的ori）组成。它既能像普通质粒一样在宿主细胞内自主复制，又能在辅助噬菌体感染时被包装成噬菌体颗粒，释放到细胞外。

2. 功能特点

   • 双模式复制：无辅助噬菌体时，以质粒形式复制；存在辅助噬菌体时，启动噬菌体复制机制，生成单链DNA并包装成颗粒。
   • 高效克隆与筛选：通常携带抗生素抗性基因（如氨苄青霉素抗性）和多克隆位点，便于外源DNA片段的插入和筛选。

3. 应用场景

   • 噬菌体展示技术：将外源蛋白基因插入phagemid，通过辅助噬菌体包装后展示在噬菌体表面，用于抗体库构建或蛋白质互作研究。
   • 单链DNA制备：包装后的噬菌体颗粒可释放单链DNA，适用于定点突变、测序等实验。

扩展说明：phagemid与普通噬菌体的区别在于其依赖辅助噬菌体完成复制周期，而自身不具备完整噬菌体功能。这种特性使其在基因操作中兼具灵活性和可控性。

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